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​离心管企业谈离心力和时间的选择方法

2021-03-22 08:33:25

目前获得PRP的方法很多,不同离心次数、离心力和离心时间获得的PRP中血小板浓度和活性各不相同。但是其制备的基本原理相同,都是根据血液中各组成成分沉降系数的不同而通过密度梯度离心法将PRP从全血中分离出来。根据离心原理,全血经一次离心后分为三层,最上层是上清即乏血小板血浆,最底层是沉降系数较大的红细胞层,交界处为一肉眼不易看出的淡黄色薄层,即富血小板血浆层;一次离心后弃去上清或者红细胞层,然后改变离心力再次离心,只要有合适的离心力和离心时间,就可以得到含有高浓度血小板的PRP。

Landesberg等以不同离心力和离心时间二次离心制备PRP,发现如果离心力大于250g,会导致血小板破坏过多;如果一次离心时间少于5分钟,得到的PRP中血小板浓度与全血无显著性差异。因此他建议一次离心后弃去红细胞再次离心,二次离心时均采取200g力离心10分钟较好。张长青等采用此法制备的PRP中血小板计数为全血的6. 17倍,血小板回收率为86.44%,他认为Landesberg法是较理想的PRP制备方法。

Sonnleitner等发现一次以160g力离心20分钟后,交界而以下6mm的血小板浓度较高;二次以400g力离心15分钟后,试管底部血小板浓度超过200万/ul,达正常血小板浓度的近10倍。而Marx等则发现一次高速离心后红细胞和上清交界而以下2mm的血小板浓度较高,因此他认为制备PRP时首先需要高速离心,弃去上清后再低速离心,这样能更好地提取血小板。目前多数学者认为,一次以低速离心后吸取全部上清、交界层及交界而下的一少部分红细胞层于另一支离心管,二次以高速离心,所得的PRP中血小板回收率较高。

理想的离心时间应该是:在一定离心力下,能使最多血小板沉淀在细胞层的上而,这样,在二次离心后就能得到体积最小、血小板浓度较高的PRP。不同离心机和不同直径与长度的一次性离心管,由于离心过程中血液有形成分沉降的原理不同,在相同离心力下对应的离心时间是不一样的,合适离心时间需综合多种因素考虑。

针对以上各点,本实验采用较低离心力和较高离心力的4种离心力组合制备PRP,离心时间采用目前常用的10min。实验结果同目前大多数学者的观点基本一致,即一次以较低离心力离心后吸取上清,二次再以较高离心力离心,所得PRP的血小板回收率较高。

离心管.jpg

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