使用离心管二次离心法制备富血小板血浆的方法

2021-02-19 11:13:31

次

一、采集抗凝血的方法

实验前动物常规饲养1周观察，一般情况，术前2d于9时由耳缘静脉采血0.5 mL,检测血常规，证实其为健康白兔。10%水合氯醛腹腔注射麻醉((2mL/mg)。用真空采血管在初次离心组兔耳背中央动脉采集2.7 mL抗凝血，混匀;另外采集0.5 mL抗凝血，测定原始血小板浓度作为对照。

二、PRP制备的方法

按表1所示离心条件进行初次离心，无菌条件下注射器吸取上部的血浆得到离心液，如果形成白膜，则首先吸取白膜之上的血浆，再将针头贴壁靠近白膜，在管壁0,4,8点钟位置，慢速轻柔吸取，每点吸取约0.05mL，连同白膜之上的血浆转移到另一无菌离心管中。密封:取离心液0.1 mL，加生理盐水0.9 mL稀释，测定血小板浓度，计算血小板收集率。

同样方法采集再次离心组的抗凝血，以初次离心确定的血小板收集率较高的离心条件初次离心，制备并收集离心液到另一个无菌一次性离心管中;按表2所示离心条件再次离心，轻柔地慢速由上至下吸取上部离心液至另一离心管，底部剩余0.5 mL离心液轻轻吹吸，使血细胞重悬于剩余的血浆中，即得PRP。取PR P0.1mL，加生理盐水0.9 mL稀释，测定血小板浓度，计算PRP中血小板浓度。

离心管.jpg